Mausmioglobin (MYO/MB) Kit ELISA Betriebsverfahren:

(1) Zu jedem Loch der zu messenden Probe 100 μ1 hinzugefügt, jede Probe mit 3 parallelen Löchern; Zwei negative Kontrolllöcher, jedes unbehandelt

Gruppe von Zell-Lysate 100 μ1; Setzen Sie ein leeres Kontrollloch und fügen Sie 100 μl reine Zellulysate hinzu.

(2) Die Enzym-Markierungsplatte 4 ° C, die Packung wird über Nacht gelegt.

(3) Plattenwaschen: Saugen Sie die Reaktionsflüssigkeit im trockenen Loch, waschen Sie es wieder mit der Waschflüssigkeit (Füllen Sie die Waschflüssigkeit mit dem Plattenloch, d. h. Entfernen), und füllen Sie die Waschflüssigkeit anschließend mit der Platte.

Loch, einweichen für 1-2 Minuten, mit Abständen schütteln. Nach dem Entfernen der Flüssigkeit aus dem Loch auf dem Absorptionspapier trocknen. Wiederholen Sie das Waschen 3-4 Mal.

(4) Negative Kontroll Loch PBS 50 μ1 pro Loch, Probe Loch und leere Loch 1: 500 verdünnte immune AIF Antikörper Arbeitsflüssigkeit 50 μ1 pro Loch hinzugefügt.

(5) Die Enzym-Markierungsplatte in einem nassen Kasten bei 37 ° C und 60 min inkubieren.

(6) Wäsche die Platte, wie (4).

(7) 1: 5.000 verdünnte HRP-markierte Ziege-Antikörper-Arbeitsflüssigkeit 100 μl pro Loch hinzufügen.

(8) Die Enzym-Markierungsplatte in einem nassen Kasten bei 37 ° C und 60 min inkubieren.

(9) Wäsche die Platte, wie (4).

(10) Zu jedem Loch fügen Sie TMB-Display-Flüssigkeit 100 μ1, mischen Sie vorsichtig 10s und setzen Sie die Reaktion bei 37 ° C in der Dunkelheit für 15-20 min.

(11) 100 µ 12mo1/LH2S04 pro Loch, um die Reaktion zu beenden.

(12) Messung von 450nm Absorptionswerten V1 und 630nm Absorptionswerten V2, der letzte gemessene 0D-Wert ist der Unterschied zwischen beiden (V1-v2), um durch den Behälter zu reduzieren

Lichtstörungen durch Kratzer oder Fingerabdrücke.

(13) Datenverarbeitung: Berechnen Sie den S/N-Wert, nachdem Sie den OD-Wert für die Probe (S) und die negative Kontrolle (N) ermittelt haben. S/N>2,1 ist ein positives Kriterium.