Fluoreszenz-Quantifizierung PCR-Kit zur Verwendung von Schweinecyst-Schwanz-Wurmsonde:

Die Empfindlichkeit der Determination stammt von den als berichteten Enzymen. Ein Enzym ist ein organischer Katalysator, bei dem eine geringe Menge an Enzymen eine große Menge an katalytischen Reaktionen induziert, die zu beobachtbaren Färbungsreaktionen führen. Daher wird dieses System oft als Enzymvergrößerungssystem bezeichnet.

1. Verdünnung des Standardprodukts: Diese Kit bietet eine Originalversion des Standardprodukts, die der Benutzer in kleinen Prüfröhren verdünnen kann, wie im folgenden Diagramm angezeigt. 24μg/ml Standard Nr. 5 150 μl Original-Standard mit 150 μl Standard-Verdünnung

12 μg/ml Standard 4 150 μl Standard 5 mit 150 μl Standard-Verdünnung

6 μg/ml Standard 3 150 μl Standard 4 mit 150 μl Standard-Verdünnung

3 μg/ml Standard 2 150 μl Standard 3 mit 150 μl Standard-Verdünnung

1,5 μg/ml Standard 1 150 μl Standard 2 mit 150 μl Standard-Verdünnung

2. Probenaufnahme: Setzen Sie jeweils leere Löcher, Standardlöcher und zu messende Probenlöcher ein. Im Enzym-Standardpaket werden genau 50 μl der Standardprobe auf der Platte geprüft, zuerst 40 μl der Probenverdünnung in das zu messende Probenloch hinzugefügt und dann 10 μl der zu messenden Probe hinzugefügt (die Endverdünnung der Probe ist das 5-fache). Die Probe wird auf den Boden des Enzym-Markierungslochs gelegt, versuchen Sie, die Lochwande nicht zu berühren und schütteln Sie sanft. |

3. Temperaturzucht: 37 ° C Temperaturzucht für 30 Minuten mit einer Dichtplatte.

4. Flüssigkeitsverteilung: 30-mal mit destilliertem Wasser verdünnt konzentrierte Waschflüssigkeit

5. Waschen: Vorsichtig entfernen Sie die Dichtungsfilm, entfernen Sie die Flüssigkeit, trocknen Sie, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit, lassen Sie es nach 30 Sekunden entfernen, so wiederholen Sie es 5 Mal, trocknen Sie.

6. Addition von Enzymen: 50 μl Enzym-Label-Reagenz pro Loch hinzugefügt, mit Ausnahme von leeren Lochen.

7. Wärmezucht: Betrieb und 3.

8. Waschen: Betrieb mit 5.

9. Farbdesignation: Fügen Sie zuerst das Farbdesignant A50 μl zu jedem Loch hinzu, fügen Sie das Farbdesignant B50 μl hinzu, schütteln Sie leicht und mischen Sie bei 37 ° C für 15 Minuten.

10. Beenden: 50 μl Endflüssigkeit pro Loch hinzufügen, um die Reaktion zu beenden (zu diesem Zeitpunkt wird blau vertikal gelb).

Messung: Messung der Absorption (OD-Wert) der einzelnen Löcher mit leerer Klimaanlage mit Null und einer Wellenlänge von 450 nm. Die Messung sollte innerhalb von 15 Minuten nach dem Zusatz des Terminals durchgeführt werden.