Rat IL-2sR Elisa Kit Waschmethode:

1. Automatische Spülmaschine: Fügen Sie 350 μl Waschflüssigkeit pro Loch hinzu, Injektion und Aussaugung im Intervall von 60 Sekunden. Fünfmal waschen.

2. Handwaschen der Platte: Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch, trocknen Sie auf sauberem Absorptionspapier, fügen Sie 350 μl Waschflüssigkeit pro Loch hinzu, einweichen Sie 1-2 Minuten, saugen Sie die Flüssigkeit (nicht berühren Sie die Plattenwand) oder entfernen Sie die Flüssigkeit im Enzym-Marker, trocknen Sie auf dickem Absorptionspapier. Fünfmal waschen.

Vor Beginn des Experiments sollten alle Reagenzien auf Raumtemperatur ausgeglichen werden. Beim Herstellen von Reagenzien oder Proben ist es notwendig, ausreichend zu mischen und Schaumstoffe möglichst zu vermeiden.

1. Probenaufnahme: Setzen Sie jeweils leere Löcher, Standardlöcher und zu messende Probenlöcher ein. Leeres Loch und Probenverdünnungsflüssigkeit 100 μl, Rest Loch jeweils Standard oder zu messende Probe 100 μl hinzufügen, achten Sie darauf, dass es keine Blasen gibt, wenn die Probe auf den Boden der Enzym-Markierplatte hinzugefügt wird, versuchen Sie, die Lochwand nicht zu berühren, schütteln Sie sanft und mischen. Die Enzym-Markierungsplatte überlagern und 2 Stunden bei 37 ° C inkubieren. Um die Wirksamkeit der Ergebnisse zu gewährleisten, verwenden Sie bei jedem Experiment eine neue Standardlösung.

2. Entfernen Sie die Flüssigkeit, trocknen Sie, fügen Sie Detection Ab Arbeitsflüssigkeit 100 μl in jedes Loch hinzu (innerhalb von 15 Minuten vor der Verwendung), Enzym-Markierungsplatte mit einer Beschichtung und 37 ° C-Temperatur für 1 Stunde.

3. Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch, trocknen Sie, waschen Sie die Platte 3 Mal, jedes Einweichen für 1-2 Minuten, etwa 350 μl / pro Loch, werfen Sie und schlagen Sie auf das absorbierende Papier, um die Flüssigkeit im Loch zu trocknen.

Trockenen 4. 100 μl pro Loch mit HRP-Konjugat-Arbeitsflüssigkeit (innerhalb von 15 Minuten vor der Anwendung) plus Membran, 37 ° C für 1 Stunde.

5. Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch, trocknen Sie, waschen Sie die Platte 5 Mal, wie in Schritt 3.

6. 100 μl Substratlösung pro Loch, Enzym-Markierungsplatte mit einer Beschichtung 37 ° C Lichtschutz inkubieren für etwa 15 Minuten (nach Bedarf verkürzt oder verlängert, je nach tatsächlicher Farbdesignation, aber nicht länger als 30 Minuten. Sie können beenden, wenn ein offensichtlicher Gradient des Standardlochs auftritt).

7. Fügen Sie 50 μl Endflüssigkeit pro Loch hinzu, um die Reaktion zu beenden, in diesem Fall wird das blaue Gelb. Die Zugabereihenfolge der Endflüssigkeit sollte möglichst dieselbe sein wie die Zugabereihenfolge der Substratflüssigkeit.

8. Messen Sie sofort die optische Dichte (OD-Wert) der einzelnen Löcher mit einem Enzym-Skalierer bei einer Wellenlänge von 450 nm. Es sollte im Voraus die Stromversorgung des Enzym-Calibrators öffnen, das Instrument vorwärmen und das Prüfverfahren einrichten.

Nach Abschluss des Versuchs wird das nicht verarbeitete Reagenz bei der vorgeschriebenen Aufbewahrungstemperatur bis zum Ende der Gültigkeitsdauer in den Kühlschrank gelagert.