Produktname ：Periphere menschliche Lymphozyten-Isolation

Produktspezifikation ：200 ml

Lagerbedingungen::RT， Lichtschutz

Gültigkeitsdauer:12 Monate

Produktbeschreibung:Dieses Produkt ist eine sterile, niedrige Endotoxinspiegel Dichtegradienten-Isolierung zur Trennung von peripheren menschlichen Lymphozyten. Sein Isolationsprinzip basiert auf der Differenz in der Dichte der Blutkörperchen (die Dichte der roten Blutkörperchen und1,090 g/mllinks und rechts; Die Dichte der Lymphozyten und Mononuklezyten1.075~1.090 g/mLBlutplatten für1.030~1.035 g/mLDurch Zentrifugieren werden die Zellen einer bestimmten Dichte nach dem entsprechenden Dichtegradienten verteilt, wodurch die Lymphozyten vom peripheren Blut oder Nabelschnurblut getrennt werden.

Produktindikatoren:Dichte1.077±0,001g / mlPenetrationsdruck290 ~ 350 mOsm / kg H2OSterile0.1μmFilterfilm Filter

Aufbewahrungsbedingungen:Dieses Produkt ist empfindlich gegen Licht, sollte bei Raumtemperatur vor Licht gelagert werden, Haltbarkeit1 Jahr. Nach sterilem Öffnen bei Raumtemperatur aufbewahren.

Betriebsschritte:1. Frisches Vollblut (EDTANatriumcitrat oder Hepatin Antikoagulation) oder Defibrin Blut, mit einem entsprechenden Volumen von Vollblut und Gewebeverdünnung oderPBSVerdünnen Sie das ganze Blut.2. Fügen Sie eine angemessene Menge an Separation in das Zentrifugerrohr hinzu (wenn das Blutvolumen nach Verdünnung kleiner ist als3 mlBeitritt, wenn3 mlTrennflüssigkeit; größer als gleich3 mlZu anderen Volumen-Separationsflüssigkeiten hinzufügen. Aber das Gesamtvolumen der beiden kann nicht mehr als zwei Drittel des Zentrifugerrohrs überschreiten, sonst beeinflusst es den Trennungseffekt), das verdünnte Blut auf die Trennflüssigkeitsoberfläche fliesen, achten Sie darauf, die Grenzfläche der beiden Flüssigkeiten klar zu halten. (Es ist möglich, das Blut mit einer Pasteur-Schleife zu saugen und das Blut vorsichtig auf die Isolierung zu fliesen, da sich aufgrund der Differenz in der Dichte beider eine offensichtliche schichtliche Schnittstelle bildet. Wenn die Probe länger genommen wird, ist es normal, dass sich rote Blutkörperchen vor der Zentrifuge absenken.)

3. Raumtemperatur, horizontaler Rotor500~1000gZentrifugieren.20 bis 30 Minuten(Je größer das Volumen des Blutes ist, desto größer die erforderliche Zentrifugalkraft, dieJe länger die Zeit, die optimalen Trennungsbedingungen zu suchen, die maximale Drehzahl der Zentrifuge nicht überschreiten1200g）。4. Nach der Zentrifugation wird eine offensichtliche Schichtung auftreten: Die oberste Schicht ist die verdünnte Plasmaschicht, in der Mitte ist die transparente Trennflüssigkeitsschicht, das Plasma und dieDie weiße Membranschicht zwischen der Abflüssigung ist die Lymphozytenschicht, und am Boden der Zentrifugerrohre sind rote Blutkörperchen und Granuläten.5. Vorsichtig die weißen Zellen in15 mlin einem sauberen Zentrifugerrohr,10ml PBSOder Zellwaschflüssigkeit, um die weißen Membranzellen zu waschen.250gZentrifugieren.10 Minuten。6. Verzicht,5 mlderPBSoder Zellreinigungsflüssigkeit Zellen wieder suspendieren,250gZentrifugieren.10 Minuten。7. Wiederholung der Schritte68. Entfernen und die Zellen wieder aufbewahren.

Trennreiheit:Die Reinheit der Isolation von Lymphozyten mit menschlicher Lymphozyten-Isolation ist größer als90%。

Hinweis:Ein.Vor dem Öffnen umgekehrt gemischt, ist diese Separation sterile Produkt, um die Aufbewahrungszeit der Separation zu verlängern, bitte unter sterilen Bedingungen zu öffnen, um mikrobielle Verunreinigung zu vermeiden.B. DieBei der Verwendung der Trennflüssigkeit sollte stets Raumtemperatur gehalten werden (18℃~25C), wenn die Raumtemperatur niedriger ist, kann die Trennflüssigkeit vorerwärmt werden.4Zentrifugieren unter niedrigeren Temperaturen kann zu einer Verschärfung der roten Blutkörperchen in der weißen Membranschicht führen.B. C.Blutproben sind am besten frisch antikoagulant (Blutentnahme)2 StundenUm die Aktivität der Lymphozyten aufrechtzuerhalten, sollten Gefrieren und Kühlen vermieden werden.D.Blut verdünnen oder Zellen waschen, nicht enthaltenCa、MgIonenpuffer und Kulturflüssigkeit, deren Zusammensetzung zur Blutzellenkoagulation führt, die die Zellrate und die Reinheit erheblich verringert.E.Einige Kunststoffprodukte (wie Polystyren) können aufgrund ihrer elektrostatischen Wirkung zu Zellwänden führen, die den Trenneffekt beeinflussen.F.Die Viskosität der Blutprobe oder die Temperaturunterschiede können den Trennungseffekt beeinflussen, so dass die Zentrifugerdrehung und die Zentrifugerzeit angepasst werden können, um die besten Trennungsbedingungen zu finden.G.Absaugen von übermäßigen Lymphozytenschichten und Isolationsschichten kann dazu führen, dass die Granulaten an der Trennflüssigkeitsgrenze abgesaugt werden, wodurch die Anzahl der gemischten Granulaten erhöht wird; Zu viel Plasmaschicht aufzunehmen kann zu einer Kontamination der Plasmaproteine und Thrombozyten in den Lymphozyten führen.Der H.Wenn Sie die isolierten Zellen weiter kultivieren möchten, achten Sie bei der Sammlung von Blut und der Trennung auf sterile Handhabung, um eine mikrobielle Kontamination zu vermeiden.Ich.Der Zelldispersion-Koeffizient und die Zellladung in unterschiedlichen Anteilen an Tierblut in unterschiedlichen Anteilen an Isolationen sind unterschiedlich, und der Benutzer sollte bei der Entwicklung der Isolationen das Anteil der gewünschten Isolationen, die Tierart und den Namen der isolierten Zellen angeben.