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Die Wirksamkeit der afrikanischen Schweinepest-Erkennungsinstrumente hängt weitgehend von der Normativität des Betriebs ab. Der Betriebsprozess der verschiedenen Arten von Instrumenten ist zwar unterschiedlich, aber der Kern dreht sich um die drei Kernlinkel "Probenverarbeitung - Prüfungsbetrieb - Interpretation der Ergebnisse", wobei die Details jedes Schrittes direkt auf die Genauigkeit der Prüfungsergebnisse auswirken, insbesondere beim Einstieg von Anfängern.

Vorbereitungen vor der Verwendung. Zunächst überprüfen Sie den Zustand der Ausrüstung, bestätigen Sie, dass die Stromanschluss stabil ist, das Kühlloch nicht blockiert ist, und das fluoreszierende quantitative PCR-Instrument muss 30 Minuten im Voraus eingeschaltet werden, um die Stabilität des Temperaturkontrollsystems sicherzustellen; Die Koloidgold-Schnellprüfgeräte müssen die Geräte und das Reagenz im Voraus in Raumtemperatur (20-25 ° C) setzen, um zu vermeiden, dass eine zu niedrige Temperatur den Reaktionseffekt beeinflusst. Gleichzeitig müssen spezielle Probenahmewerkzeuge, Einweghandschuhe usw. vorbereitet werden, um einen guten persönlichen Schutz zu gewährleisten und gleichzeitig eine Kreuzkontamination der Probe zu verhindern. Die Vorbereitung des Reagents muss die Anleitung streng befolgen, das Einführungsmittel, die Sonde und andere Gefriermittel langsam im Eisbad auftauen und nach dem Auftauen leicht umgekehrt vermischen, um starke Schüttungen zu vermeiden, die Reagentsaktivität zu zerstören.

Mit den gängigen fluoreszierenden quantitativen PCR-Testinstrumenten zum Beispiel können die Kernbetriebsschritte in vier Schritte unterteilt werden. Die Probenaufnahme und -bearbeitung sind die Grundlage der Prüfung. Die geeignete Probentyp muss je nach dem Testzweck ausgewählt werden, das lebende Schwein erhält vorrangig Antikoagulation, das kranke Schwein wählt Gewebe mit hohem Virengehalt wie Milz und Lymphknoten. Die Probe nach der Erhebung wird mit einer speziellen Lyese behandelt, um die Nukleensäure durch Zentrifuge, Adsorption, Entfernung und andere Schritte zu extrahieren, während der Prozess die Zentrifugegeschwindigkeit (in der Regel 12.000 r / min) und die Zeit (3-5 Minuten) streng kontrolliert werden müssen, um die Reinheit der Nukleensäureextraktion zu gewährleisten und Verunreinigungen wie Proteine zu vermeiden, die die Nachprüfung stören.

Der zweite Schritt ist die Herstellung des Reaktionssystems, der der Schlüssel zur Gewährleistung der Präzision ist. Im sterilen Arbeitstisch werden die extrahierten Nukleinsäureschablonen, die PCR-Reaktionsflüssigkeit und die Enzympräparate proportional in die Reaktionsröhre hinzugefügt, und bei jedem Schritt muss ein neuer Pipettenkopf verwendet werden, um Kreuzkontamination zu verhindern. Nachdem das System fertig ist, muss man den Reaktionsrohrboden leicht schlagen, um die Flüssigkeit zu vermischen, und dann einige Sekunden lang zentrifugieren, um die Blasen zu beseitigen, um zu vermeiden, dass die Blasen die Erfassung des Fluoreszenzsignals beeinflussen.

Der dritte Schritt ist die Überprüfung und die Programmeinrichtung. Legen Sie das Reaktionsrohr in den Probenschlitz des Instruments und beachten Sie, dass die Nummer mit den Probeninformationen korrekt übereinstimmt. Entsprechend der Reagenzanleitung, die das Prüfverfahren einrichtet, einschließlich der Phasen der Vorveränderung (95 ° C, 30 Sekunden), der Veränderung (95 ° C, 5 Sekunden), der Ausbrennung (60 ° C, 30 Sekunden) und anderer, beträgt die Anzahl der Zyklen in der Regel 40 Mal, während der entsprechende Fluoreszenzkanal (wie der FAM-Kanal) ausgewählt wird. Nach Abschluss der Programmeinstellung wird die Prüfung gestartet, während der Berührung des Instruments vermieden wird, um zu verhindern, dass die Verschiebung der Probenschlitze zu einem Fehler der Prüfung führt.

Der vierte Schritt ist die Interpretation und Aufzeichnung der Ergebnisse. Nach Abschluss der Prüfung erzeugt das Instrument automatisch eine Verstärkungskurve und einen CT-Wert, und die Beurteilungskriterien müssen den Reagenzanforderungen strikt entsprechen: CT-Wert ≤ 37 und die Verstärkungskurve ist typisch positiv für den Typ "S". CT-Wert > 37 oder keine Verstärkungskurve negativ; Wenn eine atypische Kurve auftritt, ist eine erneute Bestätigung erforderlich. Nach Abschluss der Prüfung müssen die Daten rechtzeitig exportiert werden, um die Probeninformationen, die Prüfzeit, den Zustand des Instruments und andere Aufzeichnungen zu erstellen, um die Nachverfolgung zu erleichtern.

Die Bedienung des Koloidgold-Schnellprüfgerätes ist einfacher und eignet sich für die schnelle Untersuchung der Grundlage. Nach der Probenbehandlung wird die angemessene Menge an Probentröpfen in das Probenbohr des Testpapiers mit einer Suchteile aufgezogen, wobei die Tropfenmenge auf 3-4 Tropfen gesteuert wird, um eine Überdosierung zu vermeiden, die zu einem Überlauf der Flüssigkeit führt. Beobachtungsergebnisse nach 15-20 Minuten: Die Qualitätskontrolle und die Prüflinie zeigen sich gleichzeitig positiv; Nur die Qualitätskontrolle ist negativ; Die farbliche Anzeige der qualitätslosen Leitung zeigt, dass die Erkennung ungültig ist und dass die Testnote erneut erkannt werden muss. Nach dem Gebrauch müssen die gebrauchten Testnoten und Probenbehälter gemäß den Spezifikationen für medizinische Abfälle behandelt werden, um die Verbreitung des Virus zu vermeiden.