1.2.1Struktur der Antikörper

Antikörper sind Immunglobuline, die sich an Antigenspezifischkeiten binden können.(Immunglobulin, Ig)。IgIn fünf Kategorien, nämlichIgG、IgA、IgM、IgDundIgEim Zusammenhang mit ImmunitätstestsIgHauptsächlich fürIgGundIgM。IgZwei leichte Ketten (L(und zwei Ketten)H(Einheitliche Zusammensetzung).IgDie leichte Kette ist die gleiche.κ（Kappa(undλ（Lambda(Zwei Typen). Fünf KategorienIgDie Schwerkettenstruktur unterscheidet sich, was ihre Widerstandsfähigkeit bestimmt.IgGundIgMDie schwere Kette heißtγ（gammaKetten undμ（im(Ketten).

Schwere und leichte KettenNDie Reihenfolge der Aminosäuren am Ende variiert je nach Antikörpern und wird als variable Zone bezeichnet.VHundVLzeigt. Beide bilden den Antigen-Bindungsbereich des Antikörpers, der nur mit dem entsprechenden Antigen bestimmt wird.Die Kombination, die spezifische Bindung auftritt, ist die strukturelle Grundlage für die spezifische Bindung von Antikörpern an Antigene.

IgGEs kann durch Papaya-Protease in drei Segmente unterteilt werden, von denen zwei identische Segmente Antigen-Bindungssegmente genannt werden (Fab）。 JederFabAlle bewahren die Fähigkeit, sich an Antigene zu binden, aber nur eineEine Antigen-Bindungsstelle ist einheitlich wertig und kann nach der Bindung an das Antigen weder koaguliert noch abgefällt werden. Ein anderer Abschnitt heißtFcKeine Antikörper-Aktivität, aber mitIgG* Widerstandsfähigkeit.

IgGEs kann durch Magenprotease in zwei Teile aufgeteilt werden, eineFabDoppelkörper, genanntF（ab'）2kann an zwei identische Antigene gebunden werden. Ein anderer ähnlicher AbschnittFcSpäter zerlegt.Kleinmolekulare Polypeptide ohne biologische Aktivität.

IgMEs besteht aus fünf Monomeren, die 10Schwere Ketten und10Eine leichte Kette, mit10Ein Antigen-Bindungspreis, aufgrund der Auswirkungen der räumlichen Lage, zeigt sich nur als fünf Antigen-Bindungspreise.IgMMolekulargewicht ungefähr900000，IgGMolekulargewicht ungefähr150000。

Nachdem der Körper mit Mikroben infiziert ist, entstehtIgMAntikörper und dann entstehenIgGAntikörper. Nach einiger Zeit,IgMDie Antikörpermenge nimmt allmählich ab und verschwindet.IgGAntikörper können langfristig vorhanden sein und mehrere Jahre nach der Erkrankung*Lange Zeit.

IgMAntikörper sind in der Regel als schützende Antikörper immun. DeshalbIgMDie Bestimmung von Antikörpern hat einen hohen klinischen diagnostischen Wert für bestimmte Infektionskrankheiten wie Hepatitis A. Rechts Hepatitis Aim Serum des PatientenIgGAntikörper undIgMZeit und Niveau des Auftretens von Antikörpern.

1.3Antigen-Antikörper-Reaktion

1.3.1可逆性

Der Prozess, bei dem Antigen und Antikörper zu einem Antigen-Antikörper-Komplex binden, ist ein dynamisches Gleichgewicht, dessen Reaktionsformel lautet:

Ag+AbAg·Ab

Antikörper (Affinitätist die inhärente Bindungskraft zwischen Antigen-Antikörpern, die mit der Gleichgewichtskonstante verwendet werden kannKAnzeige:

K = [Ag·Ab]／[Ag][Ab]

von Ag·AbAusmaß der Trennung undKWerte beziehen. Die Antigen-Bindungspunkte von hohen Affinitäts-Antikörpern und die Entscheidungskluster des Antigens sind in der räumlichen Konfiguration sehr geeignet, beide binden sich fest und sind nicht leicht zu lösen. AuflösungSpätere Antigene oder Antikörper können ihre ursprüngliche Struktur und Aktivität beibehalten, daher können Antigene oder Antikörper durch Affinitätsschichten gereinigt werden. Im Antiserum spezifischIgGAntikörper nur insgesamtIgGMitteEin sehr kleiner Teil. Spezifische Antikörper, die mit der Affinitätsschirmalyse extrahiert werden, werden als reine Antikörper der Affinitätsschirmalyse bezeichnet und können für bessere Ergebnisse bei Immunoassays angewendet werden.

1.3.2Zui-Verhältnis

Die Menge des Antikörper-Komplexes (Niederschlags) durch die Zugabe einer erhöhten Menge an Antigen zu einer konstanten Menge Antikörper1-4. Der Spitzenteil der Kurve ist ein geeigneter Bereich der Antigen-Antikörper-Verhältnisse zui, bekannt als Äquivalenzband (Zone der Äquivalenz）。 Vor und nach dem Äquivalentband sind Antikörper-Überschüsse- und Antigen-Überschüsse. Wenn Antigen oder Antikörper extrem überschüssig sind, entstehen keine Abfälle und im ImmunoassayDas sogenannte Phänomen (Zonen Phänomen）。 Antikörperüberdosierung genannt Frontband (präzoneAntigenüberdosierung wird als Hintergrundband bezeichnet (Postzone）。 Bestimmung der Resistenz durch immunologische MethodenZunächst sollte eine ausreichende Menge an Antikörpern im Reaktionssystem vorhanden sein, sonst wird die gemessene Menge kleiner als der tatsächliche Gehalt sein und sogar falsch negativ sein.

1.3.3Spezifische

Die Bindung von Antigen-Antikörpern findet im Wesentlichen nur zwischen dem Antigen-bestimmenden Cluster des Antigens und der Antigen-Bindungsstelle des Antikörpers statt. Da die beiden in chemischer Struktur und räumlicher Konfiguration komplementär sind, können AntigeneDie Antikörper-Reaktion ist sehr spezifisch. Beispielsweise Oberflächenantigen im Hepatitis B-Virus (HBsAg）、eAntigen (HBeAg(und Kern-Antikörper)HBcAgSie stammen aus dem gleichen Virus, binden jedoch nur an den entsprechenden Antikörper und nicht an die beiden anderen Antikörper.Reaktion. Diese Spezifikation der Antigen-Antikörper-Reaktion ermöglicht es dem Immunoassay, eine bestimmte Substanz in einer sehr komplexen Proteinverbindung (z. B. Serum) zu bestimmen, ohne zuerst den zu untersuchenden Gegenstand zu isolieren.。

Aber auch diese Besonderheit nicht. Wenn beide Verbindungen teilweise die gleiche Struktur aufweisen, kann eine Kreuzreaktion in der Antigen-Antikörper-Reaktion auftreten. Zum Beispiel: Hormone (HCG(und Gelbkörper produzieren Hormone)LH(Alle durchαundβEs besteht aus zwei Untereinheiten, deren Struktur sich unterscheidet.βEinheit und beides.αDie Untereinheiten sind gleich. verwendenHCGImmunitätAntiserum von Tieren enthältα-hCGund Widerstandβ-HCGZwei Antikörper gegenα-hCGAntikörper werden mitLHmitten
αEs entsteht eine Kreuzreaktion. In klinischen Tests, wieHCGAntiserum als Schwangerschaftsdiagnostikmittel zur Untersuchung des UrinsHCGkann nur verwendet werden.HCGHöhere Konzentration Tests, sonstSpuren der physiologischen Ausscheidung von Frauen im UrinLHDabei wird eine Kreuzreaktion auftreten. Daher sollte bei der Diagnose der frühen Schwangerschaft (Empfindlichkeit erreicht werden)50 mIU/mlhCGIn der Praxis mussAnwendung nur richtigHCGSpezieller Widerstandβ-HCGUm Kreuzreaktionen mit anderen Hormonen zu vermeiden.

1.3.4Empfindlichkeit

Bei der Bestimmung des Gehalts einer Substanz im Serum ist die Empfindlichkeit des chemischen Farbvergleichsmg/mlDie Empfindlichkeit der Enzymreaktionsmessung beträgt etwa5 ~ 10 μg / mlDie Empfindlichkeit der Geldiffusionsmethode und der Trübungsmethode bei der Immunoprüfung ähnelt der der Enzymreaktionsmethode. MarkierungsfreiheitDie Empfindlichkeit der Epidemie kann um das Tausendfache erhöht werden.von ng/mlEbene. Zum Beispiel durch Radioimmunassage oder EnzymimmunassageHBsAgSeine Empfindlichkeit erreichbar0,1 ng / ml。

1.4Anwendung des Immunotests in klinischen Tests

Da verschiedene Antigenbestandteile, einschließlich kleiner Moleküle, zur Herstellung spezifischer Antiserum- oder monoklonaler Antikörper verwendet werden können, kann der Antikörper als Reagenz verwendet werden, um das entsprechende Antigen in der Probe zu erkennen.Das Anwendungsspektrum des Immunotests ist daher sehr breit und kann in klinischen Tests verwendet werden, um zu bestimmen:

1）Verschiedene Proteine in der Körperflüssigkeit, einschließlich sehr geringer Mengen an Proteinen wie Metha-Fetoprotein.

2）Hormone, einschließlich Steroide mit kleinem Molekulargewicht.

3）Antibiotika und Medikamente.

4）Krankheitserreger Antigen,HBsAg、HBeAgWarten Sie.

5）Darüber hinaus können gereinigte Antigene verwendet werden, um Antikörper in Proben zu erkennen, wie z.B.HBsWarten Sie.

5Markierte Immunoprüfung

Wie oben erwähnt, ist die Immunometrie eine sehr empfindliche Messmethode, die sich nach der Antigen-Antikörper-Reaktion direkt zur Bestimmung der Abfälligkeit oder Trübung bildet, die Empfindlichkeit kann erreicht werden.5 ~ 10 μg / mlIn klinischen Tests liegen jedoch bestimmte Teststoffe in Proben weit unter diesem Niveau, daher sollten Wege gesucht werden, die Empfindlichkeit zu erhöhen. Die markierte Immunität istMarkieren Sie Antigene oder Antikörper in Testreagenzien mit spürmessbaren Substanzen, um die Empfindlichkeit durch die Bestimmung von Markern zu erhöhen. Bei der Radioimmunassage und der EnzymimmunassageFür Radionuklide und Enzyme berechnet zui die Menge der zu prüfenden Substanzen mit der Messung der Radioaktivität und der Enzymdynamik, die hundert bis tausendmal empfindlicher ist als die direkte Messung der Niederlage. Bei der markierten Immunoprüfung,In der Regel werden überdosierte Markierungsmittel hinzugefügt, um eine Reaktion mit dem Testgegenstand* zu gewährleisten. Markierung von Antikörpern (Ab^※Antigenprüfung (AgZum Beispiel ist die Reaktionsform wie folgt:

Ag + Ab^※ AgAb^※+ Ab^※

In den Reaktionsprodukten sindAgKombiniertAb^※Freiheit undAb^※ Wenn die Marker nicht getrennt werden, wird das Messergebnis die Summe beider sein. Daher ist die Trennung von freien und bindenden Markern ein wichtiger Schritt in der Marker-Immunologie. AkzeptabelIn vielerlei Hinsicht ist der Festphasenträger einer davon. Wenn ein Antigen oder Antikörper auf einem Festphase-Träger verpackt wird und dann direkt mit dem markierten Antigen oder Antikörper reagiert, wird der bindende Marker auf dem Träger festgelegt.Auf dem Körper, während freie Marker in der Lösung bleiben. So kann man durch Waschen frei werden.Ab^※Entfernt, kann die Messung des kombinierten Markers auf der Festphase durchgeführt werden.

6Enzymische Immunologie

Enzymische Immunologie (Enzymimmunoassay(kann gleichmäßig aufgeteilt werden)homogen(und ungleichmäßig)heterogen2) Zwei Arten. Im GleichgewichtEIAMittelDirekte Messung von Markern ohne Trennung von frei und gebundenen Markern. Zum Beispiel unter bestimmten Bedingungen verliert das Enzym, das sich nach der Reaktion von Antigen-Antikörpern bildet, das Enzym im Antigen-Antikörper-Komplex markiert.Seine Wirkung auf das Substrat und somit die gemessene Enzymdynamik spiegeln die freien Enzymmarker direkt wider. GleichwertigEIAWeniger in klinischen Tests eingesetzt. Nicht gleichmäßigEIAZuerst müssen die Freiheit undTrennung der kombinierten Marken. Wie bereits erwähnt, können Festphasenträger als Trennmittel verwendet werden. Diese enzymatische Immunologie wird in1971Zui wurde Anfang des Jahres als enzymbundene Immunabsorbente bekanntMessung (enzymgebundener Immunosorbentsanalysekurz genannt).ELISAIm Inland gibt es eine Übersetzung für enzymbundene Immunabsorptionstests, obwohl die Bedeutung nicht * genau ist, wurde jedoch verwendet.