Hunde-Nabelschnur-Stammzellen

Hunde-Nabelschnur-Stammzellen

|Eigenschaften:

|Zellen präsentieren:

Hunde zwischen Nabelschnur getrennt von der Nabelschnur; Nabelschnur ist eine röhrförmige Struktur, die Säugetiere mit dem Fötus und der Plazenta verbinden. Es stellt sich heraus, dass es durch die Lamifen gebildet wird, die sich mit den gelben Eifollikeln und den Handstrecken der Urinfolie umhüllen. Die Blutgefäße in der Nabelschnur, die durch die Urinmaschine passieren, sind die Nabelarterien und die Nabelvenen, die Blutgefäße der Eifollikeln sind die Nabelarterien und die Nabelarterien. Wenn die Eifollikel und ihre Gefäße degenerieren, entwickeln sich die Nabelarterien und die Nabelvenen, in denen die porose Mesocomplex der Glie zu sehen ist. In der Gebärmutter sind die Gebärmutterarterien die Kapilläre, die im Mutterteil der Plazenta ausgehen, in der Nähe der fetalen Kapilläre im Unterteil der Plazenta, wo das Blut zwischen Mutter und Fötus ausgeführt wirdCO2undO2Stoffwechselprodukte sind der Austausch von Stoffwechsel und Nährstoffen. Die Nabelarterie transportiert den Abfall des Fötus in die Plazenta und die NabelarterieO2Nährstoffe werden von der Plazenta zum Fötus transportiert. Anschließend wird der Stoffwechsel vom Fötus durch die Gebärmuttervene entfernt und bestimmte Hormone und Antikörper usw. werden auch über die Nabelschnur vom Mutterkörper an den Fötus übertragen. Die Nabelschnur enthält eine große Anzahl von Stammzellen, die Samen des Lebens sind, die sich in verschiedene Zellen des Körpers differenzieren und verschiedene Früchte hervorbringen - Blutzellen, Nervenzellen, Knochenzellen usw. Stammzellen sind Zellpopulationen mit Selbsterneuerungs-, hohem Vermehrungs- und vielfältigem Differenzierungspotenzial; Diese Zellen können ihre Eigenschaften und Anzahl aufrechterhalten, indem sie sich teilen, und können sich weiter in verschiedene Gewebezellen differenzieren, um eine aktive Rolle bei der Gewebereparation zu spielen. Stammzellen (MSCEs handelt sich um eine Stammzelle mit einem hohen Potenzial zur Selbsterneuerung und mehrdirektioneller Differenzierung. Unter verschiedenen Induktionsbedingungen kann es sich in verschiedene Gewebezellen außer den Blutformungszellen differenzieren und hat die Wirkung der Blutformungsunterstützung, Immunregulation und Gewebereparation; Derzeit wird es hauptsächlich zur Behandlung von rheumatischen Immunerkrankheiten verwendet. Stammzellen (MSCsEs handelt sich um eine erwachsene Stammzelle mit einem Potenzial zur Selbsterneuerung und mehrdienstigen Differenzierung, die in Knochenmark, Fettgewebe, Nabelblut und einer Vielzahl von fetalen Geweben vorhanden ist. Es kann eine Vielzahl von Zytokinen und Wachstumsfaktoren ausscheiden, die die Blutbildung von Stammzellen fördern (HSCZunahme und Differenzierung.MSCsEs hat auch eine immunmodulative, entzündungshemmende und Gewebereparationswirkung, die Transplantationskrankheiten gegen den Wirt lindert (GVHDund andere Komplikationen im Zusammenhang mit der Transplantation.

|Methodenbeschreibung:

Die Labor-Isolierung des Hundes Nabelschnur zwischen den ausreichenden Trocken durch die Gewebe-Plaster-Methode hergestellt, die Gesamtzahl der Zellen beträgt etwa5×10⁵Zellen/Die Flasche.

|Qualitätsprüfung:

Labor getrennt Hund NabelschnurCD90Immunofluoreszenz-Identifizierung, erreichbare Reinheit90%oben und enthält nichtHIV-1undHBVundHCVBronogene, Bakterien, Hefe und Pilze usw.

|Ausbildungsinformationen:

Kulturmedium: enthältFBSundEGFundbFGFundPenicillinundStreptomycinwarten

Wechselfrequenz: pro2-3Einmal am Tag Flüssigkeit wechseln

Wachstumsmerkmale: Wandkleber

Zellmorma: Fibrozytologisch

Eigenschaften: übertragbar3-5Rund rechts

Verdauungsflüssigkeit:0.25%

Anbaubedingungen: Gasphase: Luft,95%；CO2，5%

begrenzte in-vitro-Kulturzyklen zwischen Hundenabelsnoren; Es wird empfohlen, ein zugehöriges spezielles Wachstumsmedium und die richtige Arbeitsweise zu verwenden, um den guten Kulturzustand der Zelle zu gewährleisten.

Zellkultur Operationen:

1) Erholungszellen:Die Gefrierrohre, die die Zellsuspension enthalten, werden in einem 37 ° C Wasserbad schnell geschüttelt und aufgefroren und 4 ml Medium gleichmäßig vermischt. 4 Minuten unter 1.000 U/min zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Medium hinzufügen. Dann fügen Sie alle Zellsuspension in eine Flasche, um über Nacht zu kultivieren (oder fügen Sie die Zellsuspension in eine 10cm-Scheibe mit etwa 8ml Medium, um über Nacht zu kultivieren). Am nächsten Tag wechseln Sie die Flüssigkeit und überprüfen Sie die Zelldichte.

2) Zellenübertragung:Wenn die Zelldichte zwischen 80% und 90% beträgt, kann eine Übertragungskultur durchgeführt werden.

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium und Magnesium.

2. Fügen Sie 1 ml Verdauungsmittel (0,25% Trypsin-0,53 mM EDTA) in die Kultivflasche hinzu, legen Sie sie in einer 37 ° C-Kultivkammer für 1-2 Minuten zur Verdauung und beobachten Sie dann die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die meisten Zellen sich runden und ausfallen, nehmen Sie sie schnell wieder auf den Arbeitstisch und kloppen Sie auf die Kultivflasche und fügen Sie eine kleine Menge Medium hinzu, um die Verdauung zu beenden.

3. Drücken Sie 6-8 ml / Flasche, um das Medium zu ergänzen, schlagen Sie es sanft und saugen Sie es aus, zentrifizieren Sie es für 4 Minuten bei 1000 RPM, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und blasen Sie es nach 1-2 ml Ergänzung.

Verteilen Sie die Zellsuspension im Verhältnis 1: 2 in eine neue Schale oder Flasche mit 8 ml Medium.

3) Zellfrieren:Wenn die Zellen gut wachsen, können sie gefriert werden. Die folgenden T25 Flaschen sind in der Kategorie;

1. Wenn die Zellen einfrieren, nach dem Entfernen des Mediums, PBS reinigen und 1 ml hinzufügen, die Zellen abrunden und 1 ml Serum enthaltendes Mediums hinzufügen, um die Verdauung zu beenden, können Sie die Blutzählplatte verwenden.

2. 4 min 1000 rpm Entfernen Sie die Oberfläche. 1 ml Serum resuspendierte Zellen hinzufügen, Serum und DMSO entsprechend der Zellzahl hinzufügen, vorsichtig vermischen, DMSO Endkonzentration von 10%, Zelldichte nicht weniger als 1x106 / ml, jedes Gefrierrohr 1 ml Zellsuspension einfrieren, beachten Sie, dass das Gefrierrohr gut gekennzeichnet ist.

3. Legen Sie das Gefrierrohr in die Kühlbox des Programms, legen Sie es in einen -80-Grad-Kühlschrank und übertragen Sie es nach 2 Stunden in die Lagerung mit flüssigem Stickstoff. Aufzeichnen Sie die Position des Gefrierrohres für das nächste Mal.
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Die DNAPolymerase μ/ DNA PolμAntikörper

IGFBP3UmstrukturierenIGFBP3 / IBP3ProteinProtein

Bindungsproteine4(RBP4)Rekombiniertes ProteinRekombinantes Retinolbindendes Protein 4, Plasma (RBP4)

CD48UmstrukturierenCD48 / SLAMF2 / BCM1ProteinFcEtikett(Protein)

IL17RA Protein MenschUmstrukturierenIL17RA / CD217Protein

HA-Protein H12N5Restrukturieren Sie Grippe AH12N5 (A/grünflügelteil/ALB/199/1991)Blutglöten(Hämagglutinin / HA)Protein

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IGFBP3UmstrukturierenIGFBP3 / IBP3ProteinProtein

HA-Protein H12N5Restrukturieren Sie Grippe AH12N5 (A/grünflügelteil/ALB/199/1991)Blutglöten(Hämagglutinin / HA)Protein

CD48UmstrukturierenCD48 / SLAMF2 / BCM1ProteinFcEtikett(Protein)

| Hinweis:

1. Nach dem Empfang der nicht-roten Linie Nukleozellen zuerst beobachten, ob die Zellflasche intakt ist, ob die Kulturflüssigkeit Leckage, Trübe und andere Phänomene hat, wenn das oben genannte Phänomen auftritt, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig.

2. Lesen Sie die Anleitung zur Zelle sorgfältig, um Informationen über die Zelle wie die Zellmormologie, das verwendete Kulturmedium, das Serum-Verhältnis, die erforderlichen Zytokinen usw. zu erfahren, um sicherzustellen, dass die Zellkulturbedingungen *. Sollten Probleme mit den Zellen auftreten, die aufgrund von nicht * kultivierten Bedingungen entstehen, ist die Verantwortung des Kunden selbst.

Die Oberfläche der Zellflasche mit 75% Alkohol wischen und den Zustand der Zelle unter dem Mikroskop beobachten. Aufgrund von Transportproblemen wird eine kleine Menge an Wandzellen aus der Flasche fallen, die Zellen in der Kultivkammer für 4 bis 6 Stunden und dann beobachten lassen. Zu diesem Zeitpunkt werden die meisten Zellen an die Wand kleben, wenn die Zellen immer noch nicht an die Wand kleben können, verwenden Sie Tapan-Blau-Färbung zur Bestimmung der Zellnevität, wenn sich die Zellnevität bestätigt, dass die Zellen normal sind, stellen Sie die Zellen nach der Zentrifuge mit frischem Medium wieder an die Wand kleben; Wenn das Ergebnis der Färbung zeigt, dass die Zelle inaktiv ist, nehmen Sie bitte ein Foto und kontaktieren Sie uns rechtzeitig, und wir senden Sie es kostenlos nach der Bestätigung der Informationen.

4. Nachdem Sie die Zellwand festgelegt haben, gießen Sie das Medium in der Zellflasche aus und lassen Sie 6 bis 8 mL zur Aufrechterhaltung der normalen Zellkultur, bis die ATCC CRL-1711 (Sf9) Zellsynthese um etwa 80% normal übertragen wird.

5. Bitten Sie den Kunden, ein Medium unter den gleichen Bedingungen für die Zellkultur zu verwenden. Das überschüssige Medium in der Kulturflasche kann als Ersatz gesammelt werden, und die Zellen können in einem bestimmten Verhältnis mit dem Medium des Kunden vermischt werden, so dass sich die Zellen allmählich an die Kulturbedingungen anpassen.

Es wird empfohlen, dass der Kunde in den ersten drei Tagen nach Erhalt der Zelle ein paar Zellfotos aufnimmt, um den Zellstand aufzuzeichnen und die Kommunikation mit der Technik zu erleichtern. Aufgrund des Transports können einzelne empfindliche Zellen instabil sein, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig und informieren Sie uns über die spezifische Situation der Zelle, damit unsere Techniker den Rückbesuch verfolgen können, bis das Problem gelöst ist.

Die Zelle dient ausschließlich der wissenschaftlichen Nutzung