Fischmitz-Lymphozyten

Fischmitz-Lymphozyten

|Eigenschaften:

|Zellen präsentieren:

Fischmitz-Lymph wird vom Milzgewebe getrennt; Milz ist das große Immunorgan des Körpers und macht die Gesamtmenge des gesamten Lymphwebes aus.25%Es enthält eine große Anzahl an Lymphozyten und Makrophagen und ist das Zentrum der zellulären Immunität des Körpers und der Körperflüssigkeits-Immunität. Tief hinter der linken Rippe befindet sich die äußere Rippe Bogen, mit9－11Rippe gegenüber, lange Achse und10Rippen einheitlich. Das Gesicht grenzt an die Muskulatur und den linken Sinus, vor dem Magen, hinter der linken Niere und der linken Nebenniere, das untere Ende grenzt an die Dickdarmsmilz und das weiche Netz der Endotelzellen. Lymphozyten (LymphozytenEine Art von weißen Blutkörperchen, die von den Lymphorganen produziert werden, sind wichtige zelluläre Komponenten der Immunantwort des Körpers. Abhängig von ihrer Entstehung und Funktion können Lymphorgane in zwei Kategorien unterteilt werden: zentrale Lymphorgane (auch als primäre Lymphorgane bezeichnet) und periphere Lymphorgane (auch als sekundäre Lymphorgane bezeichnet). Ersteres umfasst die Thymisdrüse, die Hohlfollikule oder ihr Äquivalent (es wird bei Säugetieren angenommen, dass es das Knochenmark ist). Sie vermehren die Lymphozyten ohne Antigen-Stimulation und übertragen sie nach Reifung an die umliegenden Lymphorgane. Letzteres umfasst Milz, Lymphknoten usw. Reife Lymphozyten müssen sich auf Antigen-Stimulation differenzieren und vermehren, um ihre Immunfunktion zu erfüllen.

|Methodenbeschreibung:

Die Labor-Isolierung von Fisch Milz Lymph durch mechanische Schleifmethode in Kombination mit Dichte Gradient Zentrifugalmethode hergestellt, die gesamte Zellzahl von ca.5×10⁵Zellen/Die Flasche.

|Qualitätsprüfung:

Labor-isolierte Fischmitz-Lymphe wurde getestet und enthält keineHIV-1undHBVundHCVBronogene, Bakterien, Hefe und Pilze usw.

|Ausbildungsinformationen:

Kulturmedium: enthältFBSundPenicillinundStreptomycinWarten Sie!

Wechselfrequenz: pro2-3Einmal am Tag Flüssigkeit wechseln

Wachstumseigenschaften: suspendiert

Zellform: Rund

Übertragungseigenschaften: nicht vermehrt; Nicht übertragen

Verdauungsflüssigkeit:0.25%

Anbaubedingungen: Gasphase: Luft,95%；CO2，5%

begrenzte in vitro-Kultivzyklen von Fischmlein-Lymph; Es wird empfohlen, ein zugehöriges spezielles Wachstumsmedium und die richtige Arbeitsweise zu verwenden, um den guten Kulturzustand der Zelle zu gewährleisten.

Zellkultur Operationen:

1) Erholungszellen:Die Gefrierrohre, die die Zellsuspension enthalten, werden in einem 37 ° C Wasserbad schnell geschüttelt und aufgefroren und 4 ml Medium gleichmäßig vermischt. 4 Minuten unter 1.000 U/min zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Medium hinzufügen. Dann fügen Sie alle Zellsuspension in eine Flasche, um über Nacht zu kultivieren (oder fügen Sie die Zellsuspension in eine 10cm-Scheibe mit etwa 8ml Medium, um über Nacht zu kultivieren). Am nächsten Tag wechseln Sie die Flüssigkeit und überprüfen Sie die Zelldichte.

2) Zellenübertragung:Wenn die Zelldichte zwischen 80% und 90% beträgt, kann eine Übertragungskultur durchgeführt werden.

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium und Magnesium.

2. Fügen Sie 1 ml Verdauungsmittel (0,25% Trypsin-0,53 mM EDTA) in die Kultivflasche hinzu, legen Sie sie in einer 37 ° C-Kultivkammer für 1-2 Minuten zur Verdauung und beobachten Sie dann die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die meisten Zellen sich runden und ausfallen, nehmen Sie sie schnell wieder auf den Arbeitstisch und kloppen Sie auf die Kultivflasche und fügen Sie eine kleine Menge Medium hinzu, um die Verdauung zu beenden.

3. Drücken Sie 6-8 ml / Flasche, um das Medium zu ergänzen, schlagen Sie es sanft und saugen Sie es aus, zentrifizieren Sie es für 4 Minuten bei 1000 RPM, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und blasen Sie es nach 1-2 ml Ergänzung.

Verteilen Sie die Zellsuspension im Verhältnis 1: 2 in eine neue Schale oder Flasche mit 8 ml Medium.

3) Zellfrieren:Wenn die Zellen gut wachsen, können sie gefriert werden. Die folgenden T25 Flaschen sind in der Kategorie;

1. Wenn die Zellen einfrieren, nach dem Entfernen des Mediums, PBS reinigen und 1 ml hinzufügen, die Zellen abrunden und 1 ml Serum enthaltendes Mediums hinzufügen, um die Verdauung zu beenden, können Sie die Blutzählplatte verwenden.

2. 4 min 1000 rpm Entfernen Sie die Oberfläche. 1 ml Serum resuspendierte Zellen hinzufügen, Serum und DMSO entsprechend der Zellzahl hinzufügen, vorsichtig vermischen, DMSO Endkonzentration von 10%, Zelldichte nicht weniger als 1x106 / ml, jedes Gefrierrohr 1 ml Zellsuspension einfrieren, beachten Sie, dass das Gefrierrohr gut gekennzeichnet ist.

3. Legen Sie das Gefrierrohr in die Kühlbox des Programms, legen Sie es in einen -80-Grad-Kühlschrank und übertragen Sie es nach 2 Stunden in die Lagerung mit flüssigem Stickstoff. Aufzeichnen Sie die Position des Gefrierrohres für das nächste Mal.

| Hinweis:

1. Nach dem Empfang der nicht-roten Linie Nukleozellen zuerst beobachten, ob die Zellflasche intakt ist, ob die Kulturflüssigkeit Leckage, Trübe und andere Phänomene hat, wenn das oben genannte Phänomen auftritt, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig.

2. Lesen Sie die Anleitung zur Zelle sorgfältig, um Informationen über die Zelle wie die Zellmormologie, das verwendete Kulturmedium, das Serum-Verhältnis, die erforderlichen Zytokinen usw. zu erfahren, um sicherzustellen, dass die Zellkulturbedingungen *. Sollten Probleme mit den Zellen auftreten, die aufgrund von nicht * kultivierten Bedingungen entstehen, ist die Verantwortung des Kunden selbst.

Die Oberfläche der Zellflasche mit 75% Alkohol wischen und den Zustand der Zelle unter dem Mikroskop beobachten. Aufgrund von Transportproblemen wird eine kleine Menge an Wandzellen aus der Flasche fallen, die Zellen in der Kultivkammer für 4 bis 6 Stunden und dann beobachten lassen. Zu diesem Zeitpunkt werden die meisten Zellen an die Wand kleben, wenn die Zellen immer noch nicht an die Wand kleben können, verwenden Sie Tapan-Blau-Färbung zur Bestimmung der Zellnevität, wenn sich die Zellnevität bestätigt, dass die Zellen normal sind, stellen Sie die Zellen nach der Zentrifuge mit frischem Medium wieder an die Wand kleben; Wenn das Ergebnis der Färbung zeigt, dass die Zelle inaktiv ist, nehmen Sie bitte ein Foto und kontaktieren Sie uns rechtzeitig, und wir senden Sie es kostenlos nach der Bestätigung der Informationen.

4. Nachdem Sie die Zellwand festgelegt haben, gießen Sie das Medium in der Zellflasche aus und lassen Sie 6 bis 8 mL zur Aufrechterhaltung der normalen Zellkultur, bis die ATCC CRL-1711 (Sf9) Zellsynthese um etwa 80% normal übertragen wird.

5. Bitten Sie den Kunden, ein Medium unter den gleichen Bedingungen für die Zellkultur zu verwenden. Das überschüssige Medium in der Kulturflasche kann als Ersatz gesammelt werden, und die Zellen können in einem bestimmten Verhältnis mit dem Medium des Kunden vermischt werden, so dass sich die Zellen allmählich an die Kulturbedingungen anpassen.

Es wird empfohlen, dass der Kunde in den ersten drei Tagen nach Erhalt der Zelle ein paar Zellfotos aufnimmt, um den Zellstand aufzuzeichnen und die Kommunikation mit der Technik zu erleichtern. Aufgrund des Transports können einzelne empfindliche Zellen instabil sein, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig und informieren Sie uns über die spezifische Situation der Zelle, damit unsere Techniker den Rückbesuch verfolgen können, bis das Problem gelöst ist.

Diese Zelle dient ausschließlich der wissenschaftlichen Nutzung.

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