Menschliche Gallenblasenarterien Endotelzellen

Menschliche Gallenblasenarterien Endotelzellen

Grundeigenschaften der Zelle:

Zellen: Gallenblase,Es ist eine birneförmige Beutelstruktur, die sich hinter der Leber unter der rechten Rippe befindet und die Wirkung der Konzentration und Speicherung der Galle hat. Die Gallenblasenwand besteht aus drei Schichten: Schleimhaut, Muskelschicht und äußere Membran. Die Arterien bestehen aus der Endomembran, der Mittelmembran und der Außenmembran, wobei die Endomembran hauptsächlich aus Endotelzellen besteht.

Medium: Primäres Endotelzellenkultursystem

Wechselfrequenz: pro2-3 Tage Wechsel

Verdauungsflüssigkeit:0,25% Bauchspeicheldrüse

Anbaubedingungen: Gasphase: Luft, 95%; CO2 ，5%

Primäre Zellkulturmethoden:

1. Vorbereitung: Nehmen Sie alle Arten von desinfizierten Kulturprodukten auf den Reinigungstisch und UV-Desinfektion für 20 Minuten. Waschen Sie Ihre Hände vor der Arbeit und wischen Sie die Hände mit 75% Alkohol bis zum Ellenbogen.

2. Layout: Entzünden Sie die Alkohollampe und installieren Sie die Suchhütte.

3. Behandlung des Gewebes: Stellen Sie den Gewebeblock in den Becher und waschen Sie ihn 2 bis 3 Mal mit Hanks-Flüssigkeit ab, um Blutflecken zu entfernen; Wenn der Verdacht besteht, dass das Gewebe kontaminiert sein kann, kann es zuerst 30 bis 60 Minuten in eine Mischung mit blauer Farbe gelegt werden.

4. Schneiden: Schneiden Sie das Gewebe in Blöcke von 2 bis 3 mm mit Augen, um die Verdauung zu erleichtern. Fügen Sie 30 bis 50 Mal mehr Flüssigkeit als die Gesamtmenge der Gewebeblöcke hinzu und gießen Sie sie dann in eine Dreieckflasche und binden Sie die Flaschenmünde oder den Stecker mit Gel.

Verdauung: entweder mit einem thermostatischen Wasserbad oder in einem 37 ° C-Wärmekammer verdauen können, Verdauung sollte alle 20 Minuten geschüttelt werden, wie mit einem elektromagnetischen thermostatischen Rührer verdauen besser. Die Verdauungszeit hängt von der Größe des Gewebeblocks und der Härte des Gewebes ab.

6. Trennung: Wenn die Verdauungsflüssigkeit während des Verdauungsprozesses trüb ist, kann ein wenig Verdauungsflüssigkeit unter dem Spiegel angesaugt werden, wenn sich das Gewebe in Zellruppen oder einzelne Zellen verstreut hat, sofort die Verdauung beenden, sofort durch ein geeignetes Edelstahlsieb, das Gewebeblock zu filtern, das noch nicht ausreichend verdaut wurde. Niedrige Geschwindigkeit (500 ~ 1000 U / min) Zentrifuge Verdauungsflüssigkeit für 5 Minuten, saugen Sie das Oberserum aus und fügen Sie eine angemessene Menge an Kulturflüssigkeit mit Serum hinzu.

7. Zählen: Zählen Sie mit der Zählplatte, wie die Zellsuspension Zelldichte zu groß ist, und fügen Sie die Kulturflüssigkeit nach der Anpassung in die Kulturflasche. Für die meisten Zellen ist der pH-Wert im Bereich von 7,2 bis 7,4 erforderlich, und die Kulturflüssigkeit ist leicht rot, wie die Farbe des Gelbes, was darauf hindeutet, dass die Flüssigkeit sich säurig verwandelt und mit NaHCO3 angepasst werden kann.

8. Kultivierung: in 36,5 ° C Wärmekammer Kultivierung, wie mit CO2 Wärmekammer Kultivierung, Flaschendeckel muss halben Kreis entspannen.

Hinweis:

1. Kultivierung basierend auf 4 ° C kann 3-6 Monate aufbewahrt werden.

2. Achten Sie während der Zellkultur darauf, dass Sie steril arbeiten.

3. Die Verdauungszeit sollte nicht zu lang sein, sonst wird es die Zellwand und ihren Wachstumszustand beeinflussen.

4. empfiehlt dem Kunden, in den ersten 3 Tagen nach Erhalt der Zelle mehrere Zellfotos zu machen, um den Zellstand aufzuzeichnen und die Kommunikation mit der Technik zu erleichtern; Aufgrund des Transports können einzelne empfindliche Zellen instabil sein, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig und informieren Sie uns über die spezifische Situation der Zelle, damit unsere Techniker nachverfolgen und zurückkehren können, bis das Problem gelöst ist.

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