Menschliche Lungenmikrovaskuläre Endotelzellen

Grundeigenschaften der Zelle

Name der Zelle:Menschliche Lungenmikrovaskuläre Endotelzellen

Quelle: Lungengewebe

Herkunft: Mensch

Spezifikationen: 5 x 105 Zellen / T25 Zellkultur Flasche

Zellen Einführung:Menschliche Lungenmikrovaskuläre EndotelzellenIsolierung von Lungengewebe; Die Lunge ist das Atemorgan des Körpers, das sich in der Brust befindet, links und rechts, oberhalb des Herzens bedeckt. Die Lunge hat fünf Blätter, zwei links und drei rechts. Das Lungen-Lungensystem (bezieht sich auf die Atemrohre, Bronchen usw.) ist mit der Kehle und der Nase verbunden, daher wird die Kehle als das Tor der Lunge bezeichnet und die Nase als das außere Tor der Lunge. Mikrovaskuläre Endotelzellen sind eng an einer Reihe physiologischer und entzündlicher Reaktionen beteiligt, darunter Regeneration, Entwicklung und Wundheilung. Die Zellen sind schiebelförmig oder mehreckig, nach der Bildung einer Schicht sind sie kieselsteinartig oder asfaltsteinartig angeordnet. Lungenmikrovaskuläre Endotelzellen bilden eine semiselektive Barriere, die für den Austausch von Lungengasen und die Regulierung des Flusses von Flüssigkeiten und löslichen Lösungen zwischen Blut und Lungenmittel wichtig ist.

Verpackungsbedingungen: PLL (0,1 mg / ml), Gelatine (0,1%)

Kulturmedium: Enthält FBS, Wachstumsadditive, Penicillin, Streptomycin usw.

Frequenz des Wechsels: alle 2-3 Tage

Wachstumsmerkmale: Wandkleber

Zellmorma: Endotelzell

Eigenschaften: 2-3 Generationen übertragen

Verhältnis: 1:2

Verdauungsflüssigkeit: 0,25%

Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95%; CO2，5%

2. Verwendung:

Menschliche Lungenmikrovaskuläre EndotelzellenEs ist eine klebende Zelle, die Zellmorm ist endotelial-ähnlich, unter dem Standard-Betriebsprozess des Technologieministeriums können die Zellen 2-3 Generationen übertragen werden; Es wird empfohlen, so schnell wie möglich nach Erhalt der Zellen entsprechende Experimente durchzuführen.

Wenn der Kunde die Zelle erhalten hat, befolgen Sie bitte die folgenden Methoden.

Entfernen Sie die T25-Zellkulturflasche, desinfizieren Sie den Flaschenkörper mit 75% Alkohol, entfernen Sie die Mundhülle und legen Sie sie 3-4 Stunden in eine Zellkulturflasche mit 37 ° C, 5% CO2 und gesättigter Feuchtigkeit, um den Zellzustand zu stabilisieren.

2. Wandzellverdauung

1) Absaugen Sie das Medium aus der T25-Zellkulturflasche und waschen Sie die Zellen einmal mit PBS;

2) fügen Sie 0,25% Verdauungsflüssigkeit 1mL in die T25-Kulturflasche hinzu, drehen Sie die Kulturflasche leicht, um die Verdauungsflüssigkeit, die den gesamten Boden der Kulturflasche abdeckt, und saugen Sie die überschüssige Verdauungsflüssigkeit aus, 37 ° C-Bad 1-3 min; Beobachtet unter umgekehrtem Mikroskop, bis die Zellen zurückziehen, um zu kreisen, dann 5 ml Medium hinzufügen, um die Verdauung zu beenden;

3) Mischen Sie sanft mit einer Sauge, impfen Sie die T25-Kulturflasche nach dem Übertragungsverhältnis und fügen Sie das frische Medium auf 5 ml hinzu und setzen Sie es in einer Zellkultur mit 37 ° C, 5% CO2 und gesättigter Feuchtigkeit;

4) nach dem Aufkleben der Zellen, Kulturbeobachtung; Anschließend wird das frische Medium entsprechend der Frequenz des Wechsels ersetzt.

3. Zellen entfallen

1) Sammeln Sie alle Zellsuspension, 1000rpm, Zentrifuge 5min, Aufbewahrung der Niederlage;

2) 0,25% Verdauungsflüssigkeit 0,5 ml in das Zentrifugerrohr hinzufügen, die Fällung wieder suspendieren und bei 37 ° C verdauen 3 min (oder 4 ° C Kühlschrank 5-7 min); 5 ml Medium zur Beendigung der Verdauung im Zentrifugerrohr;

3) nach 1000 Umdrehungen pro Minute, Zentrifugieren 5min, werfen Sie das Oberwasser, suspendieren Sie mit 5ml Kulturmedium und impfen Sie in einer neuen Kulturflasche;

4) nach dem Aufkleben der Zellen, Kulturbeobachtung; Anschließend wird das frische Medium (37 ° C Vorwärmung) entsprechend der Flüssigkeitsaustauschfrequenz ersetzt.

5) Die Wandzellen in der ursprünglichen Flasche werden nach der normalen Verdauung behandelt.

4. Zellversuche

Aufgrund der Spezialität der Originalzellkleber müssen die Originalzellen nach der Verdauung auf andere Experimentsgeräte (wie Glas-Reptilien, Kulturplatten, Kofokuss-Petrischalen usw.) übertragen werden, um das Experimentsgerät zu verpacken, um die Zellklebigkeit zu verbessern und zu vermeiden, dass die Zellen das Experiment nicht gut beeinflussen; Pakete werden häufig mit Mausschwanzkollagen I (2-5 μg / cm2), Polylysin PLL (0,1 mg / ml), Gelatine (0,1%) abhängig von der Zelltyp gewählt. Suspendierte / halbsuspendierte Zellen müssen nicht verpackt werden.

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Hinweise zur Zellkultur:

Hinweise zur ursprünglichen Zellkultur. Primäre Zellkultur ist eine sehr wichtige experimentelle Technik, und wenn Sie diese Vorsichtspunkte kennen, können Sie Ihr Experiment reibungsloser machen.

Zunächst ist der sterile Betrieb entscheidend. Achten Sie darauf, die Betriebsumgebung sauber zu halten und Bakterien- oder Schimmelverschmutzung zu vermeiden, sonst scheitern die Experimente.

Zweitens ist die Auswahl des geeigneten Mediums und Serums ebenfalls wichtig. Unterschiedliche Zellen haben unterschiedliche Bedürfnisse an Medium und Serum, daher sollten Sie je nach Zelltyp das richtige Medium und das richtige Serum auswählen.

Außerdem ist es Bestandteil der Zellkultur. Zur frischen Zubereitung ist es auch während der Lagerung regelmäßig zu ergänzen.

Auch bei der Zellkultur ist die stationäre Kultur sehr wichtig. Die Zellen brauchen eine gewisse Zeit nach der Verdauung Isolierung, um sich an die neue Umgebung anzupassen, daher sollten Sie vermeiden, häufige Entnahme von Kulturflaschen während dieser Zeit zu beobachten.

Auch die Verdauungszeit muss richtig kontrolliert werden. Normalerweise können kleine Gewebepartikel mit dem bloßen Auge verdaut werden, und eine zu lange Verdauungszeit kann zu einer Verschärfung der Zellschäden führen und die Überlebensrate der Zellkultur beeinflussen.

Schließlich können für einige spezielle Zelltypen einige spezielle Wachstumsfaktoren hinzugefügt werden, um das Zellwachstum und die Vermehrung zu fördern. Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass die Kosten für diese Wachstumsfaktoren in der Regel höher sind.