Spezifikationen 48T Pancreatin Glykorin (GC) menschliche Kit

Spezifikationen 48T Pancreatin Glykorin (GC) menschliche Kit
Einführung
Glykorin (GC) wird auch als Glykorin oder Antiinsulin oder Insulin B bezeichnet. Es ist ein Hormon, das Insulin begleitet, das von den Insul-Alpha-Zellen der Bauchspeicheldrüse von Wirbeltieren sekretiert wird. Im Gegensatz zu Insulin spielt es eine erhöhende Wirkung auf den Blutzucker. Pancreatin aktiviert die Phosphorylase der Leberzellen durch das cAMP-PK-System und beschleunigt den Glykogenabbau. Zuckerisogenese Verbesserung ist, weil Hormone beschleunigen Aminosäuren in die Leberzellen und aktivieren Enzymsysteme, die mit dem Zuckerisogenesen Prozess verbunden sind. Pancreatin aktiviert auch Fettasen, fördert den Fettabbau und verstärkt gleichzeitig die Oxidation von Fettsäuren und erhöht die Ketogenie. Das humane GC-Immunoassay in diesem Kit ist ein dreistufiger Festphase-Klempf-ELISA zur Messung des menschlichen GC in Zellkulturen wie Oberserum, Serum und Plasma. Das Kit enthält E. coli, das recombinante menschliche GC und Antikörper gegen recombinante Proteine ausdrückt. Die Ergebnisse, die mit natürlichen menschlichen GC erhalten wurden, zeigen eine lineare Kurve, die parallel zu den Standardkurven ist, die mit rekonstruierten Normen erhalten wurden. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass das Kit zur Messung der relativen Massenwerte von natürlichen menschlichen GC verwendet werden kann.

Prüfprinzip

Kit mit dualer Antikörper-KlemmmethodeELISA-Technologie: Die Erfassung von Antikörpern Paket auf die Enzym-Markierungsplatte, die Erfassung von Proben und Standardprodukte in den zu testenden GC, nach der Inkubation reinigen, dann die markierte Detektion von Antikörpern für die Inkubation nach der Reinigung hinzufügen, um den "Erfassung von Antikörpern-Antigen-Detektion von Antikörpern" Immunkomplex zu bilden, anschließend die Kettenmoulin-gekoppelte Moringa-Peroxidase zur Inkubation hinzufügen, nach der Inkubation reinigen, dann nach dem Hinzufügen von TMB-Palette, wenn der zu testende Gegenstand in der Probe blau ist, dann fügen Sie die Reaktion zu stoppen. Die freien Bestandteile wurden während der Prüfung abgewascht, der OD-Wert wurde mit einem Enzym-Skalierer bei 450 nm gemessen, die Farbtuft war positiv proportional zum Gehalt des zu messenden Gegenstands in der Probe, und die Konzentration von GC in der Probe wurde durch die Zeichnung einer Standardkurve berechnet.

Betriebspunkte

1. Bei der Mischung von Proteinlösungen sollte immer Schaum vermieden werden. Um eine Kreuzkontamination zu vermeiden, sollte der Pipettenkopf bei jedem Zusatz von Standardprodukten, Proben und Reagenzien ausgetauscht werden. Darüber hinaus sollte jedes Reagenz separat in einem Behälter verwendet werden.

2. Stellen Sie sicher, dass das Reagenz ununterbrochen in die Plattenlöcher hinzugefügt wird. Um genaue Ergebnisse zu gewährleisten, ist eine gute Dichtungsfilm während des Inkubationsschritts erforderlich.

3. Wenn Sie eine automatische Plattenwaschmaschine verwenden, können Sie die Messgenauigkeit verbessern, indem Sie eine Einweichzeit von 30 Sekunden nach dem Zugabe des Waschpuffers hinzufügen oder die Platte um 180 Grad zwischen den Waschstufen drehen.

4. Das Farbstoff sollte farblos bleiben, bis es der Platte hinzugefügt wird. Stellen Sie sicher, dass das Farbmittel nicht durch Licht ausgesetzt ist. Das Farbstoff sollte von farblos auf blau wechseln.

5. Die Endflüssigkeit sollte in der gleichen Reihenfolge wie das Farbstoff zur Platte hinzugefügt werden. Nach Zugabe der Endflüssigkeit wird die in den Löchern gebildete Farbe von blau zu gelb. Grüne Löcher zeigen, dass die Endlösung nicht ausreichend mit der Matrixlösung gemischt ist.

Weitere benötigte Materialien

1. Enzym-Calibrator, der 450 nm Messwellenlänge enthält und 600-680 nm Korrekturwellenlänge besser enthält;

2. Pipetten und Pistolenkopfe;

destilliertes oder deionisiertes Wasser;

4. 100-1000 mL Messflasche;

5. Waschmaschine für Flaschen, Pistolen oder automatische Mikroporenplatten;

6. Horizontale Umlaufbahn Mikroporen Platte Oszillator, in der Lage, eine Geschwindigkeit von 500 ± 50 rpm zu halten;

7. Versuchsrohre zum Verdünnen von Standardprodukten und Proben.

Spezifikation48T Pancreas Glycosin (GC) menschliche Reaktionskitt
Hinweise

1. Die in diesem Kit bereitgestellte Endflüssigkeit ist eine verdünnte Schwefelsäureleisung mit einer gewissen Korrosionsfähigkeit, die vorsichtig zu bedienen ist.

Einige Inhaltsstoffe in diesem Kit enthalten Konservierungsmittel, die allergische Hautreaktionen verursachen können, und eine Maske sollte getragen werden, um Nebel zu vermeiden.

3. Farbstoff B kann Haut, Augen und Atemwege reizen und sollte eine Maske tragen, um Nebel zu vermeiden.

4. Tragen Sie Schutzhandschuhe, Augen- und Gesichtsschutzmaterialien und waschen Sie sich nach der Behandlung die Hände.

Reagenzbereitung

1. Alle Reagenzien für etwa 30 Minuten vor der Verwendung auf Raumtemperatur stellen.

2. Konfiguration der Waschflüssigkeit / Verdünnung: Wenn die Waschflüssigkeit / Verdünnung (20 x) einen Kristall ausfällt, muss sie auf 37 ° C erhitzt werden, bis der Kristall vollständig gelöst ist. Mit destilliertem Wasser 1:20 verdünnen (z.B. 1 ml konzentriertes Waschmittel mit 19 ml destilliertem Wasser)

Standardkonfiguration

Standardprodukte aus dem Kit herausnehmen, vorbereiten7 Prüfrohre, zuerst40 ng / mlStandardprodukte (200 μL) nach Bedarf eine gewisse Menge mit 1 x Verdünnung verdünnen auf 2000 pg / ml (z.B.: 50 μL Standard-Probe-Lösung + 950 μL 1 x Verdünnung, die Herstellung von 1000 μL 2000 pg / ml Konzentration Standardprodukt), anschließend in 6 Röhrchen jeweils 500 μL 1 x Verdünnung hinzufügen, in den 6 einzelnen Röhrchen 2000 pg / ml Standardprodukt in der Folge zweimal verdünnt auf 6 Gradienten, zusammen 7 Konzentrationen Standardprodukt, in der Folge:2000pg / mL, 1000pg / mL, 500pg / mL, 250pg / mL, 125pg / mL, 62,5pg / mL, 31,25pg / mL,Absorbiert aus der Konzentrationsstandardlösung500 μL Standardprodukt in das nächste Röhrchen, sanft geblasen und vermischt, so dass die Verdünnung des Standardprodukts (wie in der Abbildung gezeigt) und so weiter durchgeführt wird, 1 x Verdünnung als Nullkonzentration Standardprodukt (0 pg / mL) verwendet wird

Berechnung der Ergebnisse

Berechnen Sie den Durchschnitt der Standards- und ProbenkomponentenDer OD-Wert wird als Korrekturwert von dem leeren Loch abgezogen. Verwenden Sie die Konzentration als horizontale Koordinate und den OD-Wert als longitudinale Koordinate, zeichnen Sie eine Standardkurve für eine vierparametrische logische Funktion auf Koordinatenpapier (die Werte der leeren Gruppen werden bei der Darstellung entfernt) oder erstellen Sie eine Standardkurve mit Computersoftware, die eine vierparametrische logische (4-P)-Kurvenpassung generiert. Ist der OD-Wert der Probe höher als die Obergrenze der Standardkurve, so wird nach entsprechender Verdünnung erneut gemessen und bei der Berechnung der Probenkonzentration mit dem entsprechenden Verdünnungsvermöglichten multipliziert..

Beispieldaten

Die folgenden Daten und Kurven dienen nur zur Referenz und der Experimentierende muss Standardkurven auf der Grundlage seiner eigenen experimentellen Daten erstellen.

Die in dieser Abbildung dargestellten Standardkurven dienen nur als Beispiele. Die Ergebnisberechnung erfolgt anhand der Standardkurven, die auf dem gleichen Teststandard gezeichnet wurden.
Empfindlichkeit

Nach Probentest ist die Empfindlichkeit dieses Kits15,63 pg/ml.

Spezifische

Die Kit-Messung erkennt natürliche und rekombinante MenschenGC.

Andere verwandte Proteine werden in einem verdünnten Puffer hergestellt als50ng/mL， Kreuzreaktivität bestimmen. Es wurden keine offensichtlichen Kreuzreaktionen beobachtet.

Zusammenfassung der experimentellen Schritte
1. Standardprodukte und Proben hinzufügen, 37 ° C Lichtschutzreaktion 1,5 h, 3 Mal waschen.

2. Testen Sie Antikörper,37 ° C Lichtschutzreaktion 1 h, 4 Mal waschen.

3. enzymatische Verbindungen,Die Lichtschutzreaktion bei 37 ° C dauert 30 Minuten und wird 4 Mal gewaschen.

4. Fügen Sie die Farbflüssigkeit, 37 ° C Lichtschutzreaktion für 15 Minuten.

5. Die Endflüssigkeit hinzufügen und in 5 Minuten lesen

MenschPancreas Blutzucker(GC)Kit zur quantitativen Untersuchung von Zellkulturen in Serum, Serum und PlasmaGCBevor Sie dieses Produkt verwenden, müssen Sie diese Anleitung vollständig lesen.Menschen.ELISA-Kits sind ausschließlich für wissenschaftliche Zwecke bestimmt und können nicht für andere Diagnosen verwendet werden..