HEP-53.4 Leberkrebszellen von Mäusen

Grundinformationen

Name der Zelle：HEP-53.4 Leberkrebszellen von Mäusen

Zellnamen：HEP-53.4 ; 53.4 ; Leberkrebszellen von Mäusen

Zellenquellen：Deutschland

Zellendifizierung：STR-Zertifizierung bestanden

Zellmorm：Epiteliale Zellen, Wandwachstum

Kulturmedium：DMEM (mit NaHCO3 1,5 g/L) (BasMed-AW-013) + FBS 10% + P/S1%

Aufbaubedingungen：Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 Grad Celsius, 70% -80% Luftfeuchtigkeit

Gefrierbedingungen：Blutfreie Gefrierflüssigkeit, flüssiger Stickstoff

Zellhintergrund：Primärer Leberzellkrebs von C57BL / 6J-Mäusen, deren Leberzellen treu Leberzellkrebs repräsentieren und wertvolle Modelle für die Untersuchung dieser Art von Leberkrebs liefern, sind Synonyme für HEP-53.4 und 53.4, die leicht zu erkennen und zu kreuzen sind, Leberzellkrebs ist ein wichtiges Gesundheitsproblem, und diese Zellen, die in der Lage sind, ihre molekularen Wege, zelluläre Wechselwirkungen und Behandlungsstrategien genau zu untersuchen, stammen aus Mus musculus (Mäuse), die ein relevantes Modellsystem für das Verständnis und die Entwicklung von Behandlungen für Leberzellkrebs bieten.

Zellverwendungen：Nur für wissenschaftliche Zwecke

Zellen Lieferdauer: auf Lager, ca. 1 Woche

Hinweise

1. Regelmäßige Verdauung sammelt Zellen Zentrifuge.

2. Entfernen Sie nach der Zentrifuge die obere Reinigung im Zentrifugerrohr, fügen Sie etwa 1 ml der resuspendierten Zellen hinzu, um sie zu mischen, empfehlen wir, die Zellen leicht zu schütteln oder sanft zu schlagen, in den Kultivraum zu setzen, um die Zellen zu verdauen und dann etwa 1 Minute zu verdauen.

3. Nach der Verdauung blasen Sie die Zellsuspension sanft mit einer Pipette, damit sich die Zellklumpen verteilen, und mischen Sie schnell ein 3-5 ml Serum enthaltendes Medium hinzu, um die Verdauung zu beenden und zu entfernen.

4. Fügen Sie etwa 5 ml des entsprechenden Zellmediums hinzu und mischen Sie es proportional in die Kulturflasche / Schalen.

5. Beobachten Sie unter dem Mikroskop, ob die Zellen zu einer gleichmäßig verteilten Einzelzelle werden, wenn eine kleine Anzahl kleiner Gruppen von Zellen nicht verdaut werden müssen, so dass sie an der Wand festgelegt werden, bis das Zellwachstum stabil ist.

Normale Temperatur Versand

Nach Empfang der T25-Flasche desinfizieren und wieder in der Kultivationskammer 2-3 Stunden nach der Beobachtung der Dichte und des Zustands fotografieren 2-3 Rückmeldungen zum Verkauf, die Dichte kann übertragen werden. Das Verhältnis von 1: 2, etc. wird empfohlen, eine ganze Flasche in 1 ml Gefrierrohr einzufrieren, die andere Flasche wird weitergeleitet und wiederholt gefriert, bevor 2-3 Experimente vergrößert werden, um zu verhindern, dass plötzliche Situationen eine Trennung verursachen.

Trockeneis LieferungRegelmäßige Zellen liefern 2 Gefrierrohre, 1 Erholung, ein anderer Ersatz, wenn die erste Erholung nicht erfolgreich ist, streng nach den Anforderungen des Herstellers zur Erholung der zweiten, keine Erholung erfolgreich ist, sofort Erholungsfotos hinterlassen, um uns zu benachrichtigen.

HEP-53.4 Leberkrebszellen von Mäusen

Wandzellen

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) 0,53 mM EDTA in der Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Kammer für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie unter dem Mikroskop die Verdauungssituation der Zellen, wenn die meisten der Zellen sich runden und fallen, nehmen Sie schnell den Arbeitstisch zurück, klicken Sie auf die Flasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10% FBS enthält, um die Verdauung zu beenden.

3. Nach sanftem Schlagen und Absaugen, 3-5 Minuten unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Verteilen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche / 6 cm-Petrischale, fügen Sie 6-8 ml eines neuen Mediums hinzu, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

4. Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

5. Transport-Medium (Irrigation-Medium) kann nicht mehr verwendet werden, um Zellen zu kultivieren, bitte ersetzen Sie das Medium nach den Bedingungen der Anleitung Zellkultur neu formuliert Zellen zu kultivieren.

Suspendierte Zellen

Die Zellen, die im Zustand der Suspension wachsen, können den Wachstumszustand der Zellen aufrechterhalten, indem sie Medium in die Flasche hinzufügen, und im Allgemeinen kann die Zelldichte bei 1 x 105 ~ 1 x 106 / ml (unterschiedliche Zellen für unterschiedliche Dichtenforderungen) aufrechterhalten werden, um das normale Zellwachstum aufrechtzuerhalten. Wenn Sie die Zellsuspension in 1000 rpm in der Zentrifugeröhre sammeln möchten, 5 min zentrifugieren, den oberen Reinigungsmittel entfernen, 1-2 ml Kultur hinzufügen und die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in die neue T25-Flasche aufteilen, 6-8 ml hinzufügen, das neue Medium gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um die Wachstumsleistung der Zelle aufrechtzuerhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 ~ 1: 4 nach den tatsächlichen Umständen.

Transportform

Tieftemperatur: 1ml Gefrierrohr verpackt Trockeneis Transport, nach Erhalt von -80 Grad Kühlschrank aufbewahren über Nacht in flüssigen Stickstoff oder direkt Erholung, wenn Trockeneis gefunden wurde flüchtig und sauber, Gefrierrohr Flaschendeckel fallen, zerstört und Zellen verschmutzt, bitte kontaktieren Sie uns sofort.

Normale Temperatur: T25-Flasche Erholung von überlebenden Zellen bei normaler Temperatur geliefert und nach Empfang nach der Behandlung der Zellen nach Empfang.

Biologische Sicherheit

1. Alle Tierzellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen und müssen in einem Biosicherheitsstand der zweiten Stufe betrieben werden, und bitte achten Sie darauf, dass alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung kommen, sterilisiert werden müssen, bevor sie entsorgt werden können.

Es wird empfohlen, immer Schutzhandschuhe, Kleidung und eine Schutzmaske zu tragen, wenn Sie gefrorene Zellen wiederherstellen. Hinweis: Ein Gefrierrohr, das in flüssigen Stickstoff eingetaucht ist, leckt und wird langsam mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Wenn flüssiger Stickstoff in eine Gasphase umgewandelt wird, kann der Behälter explodieren oder seinen Deckel mit gefährlicher Kraft abblasen, wodurch fliegendes Schutt verursacht wird, das Menschen verletzt.

Besondere Aufmerksamkeit

Die Zelle wächst gut in einem DMEM-Medium (enthaltend 1,5 g/LNaHCO3) und die meisten DMEM enthalten höhere Konzentrationen von NaHCO3 (3,7 g/L), was eine erhöhte CO2-Konzentration (7% -10%) erfordert, wenn Zellen mit einem DMEM-Medium (3,7 g/L NaHCO3) kultiviert werden.