MOC1 Zelllinie

Grundinformationen

Zellname:MOC1 Zelllinie

T150 Flasche: 07-200-64

T75 Flasche: 10-126-37

Gefriermittel: 03-374-059

45um Filter: 09-754-21

Inertes Spektrum: MOC1,22

Aggressive Linie: MOC2

IMDM: sh30228.02 Hams

Nährstoffmischung F10-F12 : sh30026.01 fetales Rinderserum, Eigenschaften - Meerklon

Katalog / Seriennummer :sh30071.03 / AWK24001

Filter für 1L Filterflaschen : 09-761-108

Wissenschaftliche Reagentenummer Insulin: I6634-50mg

EMD Mikroporenreagenten Katalognummer: Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), Human recombinant: 01-107

MOC1 Zelllinie

Entfrorene Zelllinien

1. Fügen Sie 21 ml IMDM MOC-Linienmedium in T150 vor dem Auftauten hinzu (10 ml in T75, wenn Sie zu T75 auftauten möchten)2. Entfernen Sie flüssigen Stickstoff aus der Gefrierflasche und sprühen Sie auf eine Flasche mit 70% Alkohol.

Legen Sie die untere Hälfte der Gefrierflasche in einem Wasserbad bei 37 Grad Celsius (lassen Sie den Deckel nicht mit Wasser in Berührung treten, um Verschmutzung zu vermeiden), bis ein kleines Stück Eis schwebt.

Sprühen Sie die Gefrierflasche erneut mit ETOH und legen Sie sie dann auf die Motorhaube. Fügen Sie 1 ml Kulturflüssigkeit Pipette zu 1 ml Zellen und fügen Sie diese 2 ml zu T150, die bereits das Medium enthält (so dass ein T150 insgesamt 22 ml).

5. Nehmen Sie ein paar Medien in der T150-Flasche, spülen Sie die Gefrierflasche und legen Sie die Tablette auf, um sicherzustellen, dass alle verbleibenden Zellen in der Gefrierflasche bleiben.

Gefrorene Zelllinien
1. Sammlung von Zellen aus T150

2. In einem 15 ml Kegelrohr zu Partikeln drehen (1000 RPM x 5 Minuten)

3. Entfernen der Oberflüssigkeit

4. Klicken Sie auf eine 15ml Kegelröhre und suspendieren Sie die Zellen wieder

5. Fügen Sie 1,5 ml IMDM MOC-Medium hinzu, um die Zellen im Medium wieder aufzubauen - auf Eis zu halten

6. Zugabe von 1,5 ml Gefriermedium langsam beim Einleitung von Eis (Herstellung von Gefriermedium-20% DMSO in IMDM MOC-Linienmedium). Beispiel: 20 ml Bestand - 16 ml IMDM MOC-Linie-Kultivmedium und 4 ml DMSO hinzufügen. Spritzenfilter mit Umfilter

1 bis 3 Gefrierflaschen pro Portion

8. Lagern Sie nicht länger als 2 Wochen bei -80 Grad Celsius

9. In flüssiger Stickstofflösung innerhalb von 1-2 Wochen geben

Hinweis:Bei Bedarf kann auf 2 ml IMDM und 2 ml gefriertes Medium erhöht werden, um in 4 Flaschen gelagert zu werden. Darüber hinaus ist es am besten, die Zellen zu zählen und auf die Flasche aufzunehmen, bevor sie gefroren werden.