Moc1/Moc2 Maus Mundscheibenzellenkrebs / Weiblich

Grundinformationen

Name der Zelle：Moc1/Moc2 Maus-Mund-Skamazellkrebs

Zellstamm：C57BL/6 Cxcr3-/-

Zellenquellen：Im Ausland

Zellendifizierung：STR-Zertifizierung bestanden

Zellmorm：Lymphoma polygonale Zellen-ähnlich, Wandkleber + Suspension Wachstum

Kulturmedium：DMEM (enthält NaHCO3 1,5 g / L) (BasMed-AW-013) + FBS 10% + P / S1% 500 ml Medium: IMDM: F10 / F12 = 2: 1313 ml: 157 ml Medium + FBS 10% (50 ml) + 2,5 mg / 500 ml Insulin + 20 ug / 500 ml + 2,5 ug / 500 ml EGF + P / S 1% Dual Antibody, 1%.

Aufbaubedingungen：Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 Grad Celsius, 70% -80% Luftfeuchtigkeit

Zellhintergrund：Oral squamous cell cancer (OSCC) ist eine prominente Subset von Kopf- und Halskrebs, der sechs häufigste Krebsarten ist. Der Hauptrisikofaktor für das Auftreten von OSCC ist die Exposition an karzinogenen Substanzen, die diese Untergruppe von Kopf- und Halskrebs von einem humanen Onkovirus induziertem Kopf- und Halskrebs unterscheiden. Trotz Fortschritte bei der Untersuchung, der Operation, der Chemotherapie und der Strahlentherapie ist die Prognose für OSCC seit Jahrzehnten stabil geblieben. Darüber hinaus leiden etwa zwei Drittel der OSCC-Patienten zum Zeitpunkt der Diagnose an einer lokalen fortgeschrittenen Erkrankung, die zu einer erhöhten Inzidenz und Mortalität führt.

Zellverwendungen: Nur für wissenschaftliche Zwecke

Hinweise

1. MOC1 Zell Aktivität ist besonders hoch, die Wertschöpfungsrate ist sehr schnell, empfehlen Sie nicht, die Übertragungsdichte zu groß ist, und wählen Sie eine seltenere Wiederverlegung, und so weiter, wenn etwa 80% der Übertragung voller ist, ist es schwer zu verdauen, empfehlen Sie, 0,25% EDTA hinzuzufügen, nachdem alle Zellen vollständig vermischt werden, die in Kontakt stehen, in den Kultivraum für die Verdauung gelegt werden, die Dauer ist etwa 3-4 Minuten nach dem Entfernen.

2. auf der Seite des Kulturgefäßes zu schlagen, um Zellen zu entfernen, der Schlagprozess dauert etwa 2 Minuten, bevor die meisten Zellen entfernt werden, wenn das Entfernungsverhältnis noch nicht viel ist, kann man auch wieder in die Kultivkammer zurücksetzen, um 1-2 Minuten nach der Verdauung fortzusetzen, um erneut herauszuholen, um die Zellen zu entfernen, warten, bis 80-90% der Zellen entfernt sind, um die Verdauung zu beenden, die Zentrifuge wiederaufhängt und die Flasche wieder auflegt, um sich gleichmäßig zu verteilen.

3. MOC2-Zellen sind nicht besonders fest, wie die Wand und konventionelle Zellen ähnlich. Der Multiplizierungszyklus ist auch nicht MOC1 schnell. Verwenden Sie konventionelle Verdauungsmethoden.

Normale Temperatur Versand

Nach Empfang der T25-Flasche desinfizieren und wieder in der Kultivationskammer 2-3 Stunden nach der Beobachtung der Dichte und des Zustands fotografieren 2-3 Rückmeldungen zum Verkauf, die Dichte kann übertragen werden. Das Verhältnis von 1: 2, etc. wird empfohlen, eine ganze Flasche in 1 ml Gefrierrohr einzufrieren, die andere Flasche wird weitergeleitet und wiederholt gefriert, bevor 2-3 Experimente vergrößert werden, um zu verhindern, dass plötzliche Situationen eine Trennung verursachen.

Trockeneis LieferungRegelmäßige Zellen liefern 2 Gefrierrohre, 1 Erholung, ein anderer Ersatz, wenn die erste Erholung nicht erfolgreich ist, streng nach den Anforderungen des Herstellers zur Erholung der zweiten, keine Erholung erfolgreich ist, sofort Erholungsfotos hinterlassen, um uns zu benachrichtigen.

Wandzellen

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) -0,53 mM EDTA in der Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Kammer für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie die Zellverauung unter dem Mikroskop, wenn die Zellen sich größtenteils runden und ausfallen, nehmen Sie schnell den Arbeitstisch zurück, klicken Sie auf die Flasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10% FBS enthält, um die Verdauung zu beenden.

3. Nach sanftem Schlagen und Absaugen, 3-5 Minuten unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Verteilen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche / 6 cm-Petrischale, fügen Sie 6-8 ml eines neuen Mediums hinzu, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

4. Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

5. Transport-Medium (Irrigation-Medium) kann nicht mehr verwendet werden, um Zellen zu kultivieren, bitte ersetzen Sie das Medium nach den Bedingungen der Anleitung Zellkultur neu formuliert Zellen zu kultivieren.

Suspendierte Zellen

Die Zellen, die im Zustand der Suspension wachsen, können den Wachstumszustand der Zellen aufrechterhalten, indem sie Medium in die Flasche hinzufügen, und im Allgemeinen kann die Zelldichte bei 1 x 105 ~ 1 x 106 / ml (unterschiedliche Zellen für unterschiedliche Dichtenforderungen) aufrechterhalten werden, um das normale Zellwachstum aufrechtzuerhalten. Wenn Sie die Zellsuspension in 1000 rpm in der Zentrifugeröhre sammeln möchten, 5 min zentrifugieren, den oberen Reinigungsmittel entfernen, 1-2 ml Kultur hinzufügen und die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in die neue T25-Flasche aufteilen, 6-8 ml hinzufügen, das neue Medium gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um die Wachstumsleistung der Zelle aufrechtzuerhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 ~ 1: 4 nach den tatsächlichen Umständen.

Biologische Sicherheit

1. Alle Tierzellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen und müssen in einem Biosicherheitsstand der zweiten Stufe betrieben werden, und bitte achten Sie darauf, dass alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung kommen, sterilisiert werden müssen, bevor sie entsorgt werden können.

Es wird empfohlen, immer Schutzhandschuhe, Kleidung und eine Schutzmaske zu tragen, wenn Sie gefrorene Zellen wiederherstellen. Hinweis: Ein Gefrierrohr, das in flüssigen Stickstoff eingetaucht ist, leckt und wird langsam mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Wenn flüssiger Stickstoff in eine Gasphase umgewandelt wird, kann der Behälter explodieren oder seinen Deckel mit gefährlicher Kraft abblasen, wodurch fliegendes Schutt verursacht wird, das Menschen verletzt.